Изучение фармакокинетики доксициклина в образцах крови телят после применения комплексного препарата Флоридокс фирмы NITA-FARM

Автор статьи:

С. В.Абрамов (ГНУ ВНИИВСГЭ)

Ключевые слова: телята, фармакокинетика, доксициклин (Key words: calves, pharma-cokinetics, doxycycline)

В статье представлен метод определения и дана оценка фармакокинетических параметров доксициклина в крови телят после применения комплексного препарата Флоридокс в дозе 1 мл/15 кг массы животного.

Введение

Исследуемый препарат Флоридокс представляет собой антибактериальное лекарственное средство пролонгированного действия в форме раствора для инъекций. В качестве действующих веществ содержит 5% доксициклина гиклата и 10% флорфеникола. Лекарственная форма препарата разработана ЗАО «Нита-фарм» (г. Саратов).

Препарат Флоридокс рекомендован для лечения колибактериоза, пастереллеза, сальмонеллеза, стафилококкоза, гемофилеза, хламидиоза, лептоспироза, энзоотической пневмонии, микоплазмоза, респираторных заболеваний и других инфекций у сельскохозяйственных животных.

Целью настоящего исследования является оценка фармакокинетических параметров доксициклина в крови телят после применения препарата Флоридокс.

Материалы и методы

Исследование фармакокинетики доксициклина выполняли на 10 телятах швицкой породы массой 72-75 кг в возрасте 3,5-4 месяца. Животным вводили препарат однократно внутримышечно, в дозе 1 мл на 15 кг массы для телят была выбрана на основе имеющихся литературных данных. Перед введением препарата у телят брали кровь (фоновые показатели). В дальнейшем отбор проб крови у телят проводился через 0,5; 1, 2, 3, 6, 9, 12 и 24 часа после введения препарата. Данная схема позволила получить адекватные профили фармакокинетических кривых «концентрация-время» доксициклина для последующего расчета фармакокинетических параметров.

Кровь у телят в количестве 10-12 мл отбирали в стеклянные пробирки.

Определение доксициклина в образцах плазмы крови телят проводили с использованием метода хроматомассспектрометрии.

Хроматографические условия

Разделение проводилось на колонке Phenomenex Luna 3u С 18(2), 50*3.00мм.

Состав мобильной фазы: 50% ацетонитрила, 50 % 0.1% раствора уксусной кислоты. Скорость потока составляла 0,2 мл/мин. Объём вкола составлял 20 мкл.

Масспектрометрические условия

Метод ионизации: электроспрей (ESI).
Температура ионизации: 390'С.
Параметры ионизации: Доксициклин - Q 1=445.0, Q3=428.0, DP=41.6, ЕР=3.8, СЕ=24.7, СХР=6.3;
Внутренний стандарт - Q1 = 136.0, Q3=l 19.0 (DP,EP,CE,CXP соответствуют сопряженному аналиту).

Экстракция

К 0,5 мл образца добавляли 2 мл фосфатно-сульфитного буфера (ЗМ КН2РО4 и 1М Na2S03) и 6 мл смеси этилацетат-изопропиловый спирт (88:12 v/v). Смесь перемешивали на Vortex и центрифугировали при 3000 rpm в течение 5 минут, органический слой отделяли и упаривали. Сухой остаток восстанавливали с помощью 0,5 мл мобильной фазы и анализировали.

Как видно из анализа калибровочных кривых степень извлечения компонента при экстракции по данной методике составляет 68%. Во всём выбранном диапазоне концентраций наблюдается линейная зависимость аналитического сигнала от концентрации образца.

График 1 - Калибровочная кривая доксициклина для растворов в элюенте

График 2 - Калибровочная кривая доксициклина для растворов образцов

Таблица 1 - Зависимости площади пика доксициклина от концентрации для растворов образцов плазмы телят

С (мкг/мл)	S(cps*c)
10.00	1,89Е6
2.50	4,44Е5
1,00	1,87Е5
0,50	7,33 Е4
0,25	3,20Е4
0,01	2,40ЕЗ

Результаты исследования

Результаты изучения фармакокинетики доксициклина в плазме крови телят представлены в таблице 2 и графике 3. Анализируя данные таблицы 2 и графика 3 следует отметить наличие двух пиков концентрации содержания доксициклина в плазме телят, соответствующих 2 и 9 часам. Второй пик может объясняться как повторным всасыванием препарата в кишечнике после выделения его печенью с желчью, так и использованием пролонгирующего компонента в лекарственной форме. Низкая концентрация действующего вещества объясняется высокой степенью связывания компонента с белками крови (до 93%). Тем не менее, использование пролонгированной формы препарата позволяет стабилизировать концентрацию препарата в крови в течение 24 часов.

График З - График изменения концентрации доксициклина в образцах плазмы телят

Таблица 2 - Среднее содержание доксициклина в образцах плазмы крови телят и величина стандартного отклонения

t, ч	С, мкг/мл	±, мкг/мл	%
0	0,000	0,001	9
I	0,056	0,007	13
2	0,049	0,008	16
3	0,032	0,003	8
5	0,044	0,010	22
6	0,040	0,009	23
9	0,042	0,009	22
12	0,026	0,007	25
24	0,024	0,005	20

Заключение:

Использование пролонгированной формы препарата Флоридокс в дозе 1 мл/15кг массы телят позволяет обнаруживать доксициклин в высокой концентрации в течение 24 часов.

A study of the pharmacokinetics Hot -fenikol in blood samples of calves after a comprehensive drug Floridoks ("Nita-Farm"). S.V.Abramov SUMMARY This paper presents a method for determining the pharmacokinetics florfenikol blood of calves. The product is used in doze. 1 ml/15 kg of animal weight.

Литература:

1. European Pharmacopoeia, 6.0, 01V2008 -V.2,, P. 1760, 1762
2. Freedom of Information Summary NADA 141-082 19.11.1997
3. Joshi M, Miller D.Q. Doxycycline revisited. Arch. Intern. Med. 1997; 157: 14211428.