Изучение фармакокинетики доксициклина в образцах крови телят после применения комплексного препарата Флоридокс фирмы NITA-FARM
Автор статьи:
Абрамов С. В., кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник ВНИИ Паразитологии имени К. И. Скрябина
Ключевые слова: телята, фармакокинетика, доксициклин (Key words: calves, pharma-cokinetics, doxycycline)
В статье представлен метод определения и дана оценка фармакокинетических параметров доксициклина в крови телят после применения комплексного препарата Флоридокс в дозе 1 мл/15 кг массы животного.
Введение
Исследуемый препарат Флоридокс представляет собой антибактериальное лекарственное средство пролонгированного действия в форме раствора для инъекций. В качестве действующих веществ содержит 5% доксициклина гиклата и 10% флорфеникола. Лекарственная форма препарата разработана ЗАО «Нита-фарм» (г. Саратов).
Препарат Флоридокс рекомендован для лечения колибактериоза, пастереллеза, сальмонеллеза, стафилококкоза, гемофилеза, хламидиоза, лептоспироза, энзоотической пневмонии, микоплазмоза, респираторных заболеваний и других инфекций у сельскохозяйственных животных.
Целью настоящего исследования является оценка фармакокинетических параметров доксициклина в крови телят после применения препарата Флоридокс.
Материалы и методы
Исследование фармакокинетики доксициклина выполняли на 10 телятах швицкой породы массой 72-75 кг в возрасте 3,5-4 месяца. Животным вводили препарат однократно внутримышечно, в дозе 1 мл на 15 кг массы для телят была выбрана на основе имеющихся литературных данных. Перед введением препарата у телят брали кровь (фоновые показатели). В дальнейшем отбор проб крови у телят проводился через 0,5; 1, 2, 3, 6, 9, 12 и 24 часа после введения препарата. Данная схема позволила получить адекватные профили фармакокинетических кривых «концентрация-время» доксициклина для последующего расчета фармакокинетических параметров.
Кровь у телят в количестве 10-12 мл отбирали в стеклянные пробирки.
Определение доксициклина в образцах плазмы крови телят проводили с использованием метода хроматомассспектрометрии.
Хроматографические условия
Разделение проводилось на колонке Phenomenex Luna 3u С 18(2), 50*3.00мм.
Состав мобильной фазы: 50% ацетонитрила, 50 % 0.1% раствора уксусной кислоты. Скорость потока составляла 0,2 мл/мин. Объём вкола составлял 20 мкл.
Масспектрометрические условия
Метод ионизации: электроспрей (ESI).
Температура ионизации: 390'С.
Параметры ионизации: Доксициклин - Q 1=445.0, Q3=428.0, DP=41.6, ЕР=3.8, СЕ=24.7, СХР=6.3;
Внутренний стандарт - Q1 = 136.0, Q3=l 19.0 (DP,EP,CE,CXP соответствуют сопряженному аналиту).
Экстракция
К 0,5 мл образца добавляли 2 мл фосфатно-сульфитного буфера (ЗМ КН2РО4 и 1М Na2S03) и 6 мл смеси этилацетат-изопропиловый спирт (88:12 v/v). Смесь перемешивали на Vortex и центрифугировали при 3000 rpm в течение 5 минут, органический слой отделяли и упаривали. Сухой остаток восстанавливали с помощью 0,5 мл мобильной фазы и анализировали.
Как видно из анализа калибровочных кривых степень извлечения компонента при экстракции по данной методике составляет 68%. Во всём выбранном диапазоне концентраций наблюдается линейная зависимость аналитического сигнала от концентрации образца.
График 1 - Калибровочная кривая доксициклина для растворов в элюенте
График 2 - Калибровочная кривая доксициклина для растворов образцов
Таблица 1 - Зависимости площади пика доксициклина от концентрации для растворов образцов плазмы телят
С (мкг/мл) |
S(cps*c) |
10.00 |
1,89Е6 |
2.50 |
4,44Е5 |
1,00 |
1,87Е5 |
0,50 |
7,33 Е4 |
0,25 |
3,20Е4 |
0,01 |
2,40ЕЗ |
Результаты исследования
Результаты изучения фармакокинетики доксициклина в плазме крови телят представлены в таблице 2 и графике 3. Анализируя данные таблицы 2 и графика 3 следует отметить наличие двух пиков концентрации содержания доксициклина в плазме телят, соответствующих 2 и 9 часам. Второй пик может объясняться как повторным всасыванием препарата в кишечнике после выделения его печенью с желчью, так и использованием пролонгирующего компонента в лекарственной форме. Низкая концентрация действующего вещества объясняется высокой степенью связывания компонента с белками крови (до 93%). Тем не менее, использование пролонгированной формы препарата позволяет стабилизировать концентрацию препарата в крови в течение 24 часов.
График З - График изменения концентрации доксициклина в образцах плазмы телят
Таблица 2 - Среднее содержание доксициклина в образцах плазмы крови телят и величина стандартного отклонения
t, ч |
С, мкг/мл |
±, мкг/мл |
% |
0 |
0,000 |
0,001 |
9 |
I |
0,056 |
0,007 |
13 |
2 |
0,049 |
0,008 |
16 |
3 |
0,032 |
0,003 |
8 |
5 |
0,044 |
0,010 |
22 |
6 |
0,040 |
0,009 |
23 |
9 |
0,042 |
0,009 |
22 |
12 |
0,026 |
0,007 |
25 |
24 |
0,024 |
0,005 |
20 |
Заключение:
Использование пролонгированной формы препарата Флоридокс в дозе 1 мл/15кг массы телят позволяет обнаруживать доксициклин в высокой концентрации в течение 24 часов.
A study of the pharmacokinetics Hot -fenikol in blood samples of calves after a comprehensive drug Floridoks ("Nita-Farm"). S.V.Abramov SUMMARY This paper presents a method for determining the pharmacokinetics florfenikol blood of calves. The product is used in doze. 1 ml/15 kg of animal weight.
Литература:
- European Pharmacopoeia, 6.0, 01V2008 -V.2,, P. 1760, 1762
- Freedom of Information Summary NADA 141-082 19.11.1997
- Joshi M, Miller D.Q. Doxycycline revisited. Arch. Intern. Med. 1997; 157: 14211428.